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  1. 学術雑誌・学外紀要・定期刊行物等掲載論文・記事

In-gel protein phosphatase assay using fluorogenic substrates

https://kagawa-u.repo.nii.ac.jp/records/525
https://kagawa-u.repo.nii.ac.jp/records/525
ca38e53e-3dc1-48ae-89ee-4a7b48fab196
名前 / ファイル ライセンス アクション
AA00524867_400_1_118.pdf AA00524867_400_1_118 (664.1 kB)
Item type 学術雑誌論文 / Journal Article(1)
公開日 2012-03-27
タイトル
タイトル In-gel protein phosphatase assay using fluorogenic substrates
言語 en
言語
言語 eng
資源タイプ
資源タイプ識別子 http://purl.org/coar/resource_type/c_6501
資源タイプ journal article
アクセス権
アクセス権 open access
アクセス権URI http://purl.org/coar/access_right/c_abf2
著者 亀下, 勇

× 亀下, 勇

ja 亀下, 勇

ja-Kana カメシタ, イサム

en Kameshita, Isamu

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馬場, 裕美

× 馬場, 裕美

ja 馬場, 裕美

ja-Kana ババ, ヒロミ

en Baba, Hiromi

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梅田, 嘉徳

× 梅田, 嘉徳

ja 梅田, 嘉徳

ja-Kana ウメダ, ヨシノリ

en Umeda, Yoshinori

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末吉, 紀行

× 末吉, 紀行

ja 末吉, 紀行

ja-Kana スエヨシ, ノリユキ

en Sueyoshi, Noriyuki

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抄録
内容記述タイプ Abstract
内容記述 We developed a method for the detection of phosphatase activity using fluorogenic substrates after polyacrylamide gel electrophoresis. When phosphatases such as Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase phosphatase (CaMKP), protein phosphatase 2C (PP2C), protein phosphatase 5 (PP5), and alkaline phosphatase were resolved by polyacrylamide gel electrophoresis in the absence of SDS and the gel was incubated with a fluorogenic substrate such as 4-methylumbelliferyl phosphate (MUP), all of these phosphatase activities could be detected in situ. Although 6,8-difluoro-4-methylumbelliferyl phosphate (DiFMUP) as well as MUP could be used as a fluorogenic substrate for an in-gel assay, MUP exhibited lower background fluorescence. Using this procedure, several fluorescent bands that correspond to endogenous phosphatases were observed after electrophoresis of various crude samples. The in-gel phosphatase assay could also be used to detect protein phosphatases resolved by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. In this case, however, the denaturation/renaturation process of resolved proteins was necessary for the detection of phosphatase activity. This procedure could be used for detection of renaturable protein phosphatases such as CaMKP and some other phosphatases expressed in cell extracts. The present fluorescent in-gel phosphatase assay is very useful, since no radioactive compounds or no special apparatus are required.
言語 en
書誌情報 en : Analytical biochemistry

巻 400, 号 1, p. 118-122, 発行日 2010-05-01
出版者
出版者 Elsevier
言語 en
ISSN
収録物識別子タイプ PISSN
収録物識別子 1096-0309
書誌レコードID
収録物識別子タイプ NCID
収録物識別子 AA00524867
権利
言語 en
権利情報 Copyright © 2009 Elsevier Inc. All rights reserved.
論文ID(NAID)
関連タイプ isVersionOf
識別子タイプ NAID
関連識別子 80020966117
PubMed番号
識別子タイプ PMID
関連識別子 20045670
関連サイト
関連タイプ isVersionOf
識別子タイプ DOI
関連識別子 https://doi.org/10.1016/j.ab.2009.12.035
著者版フラグ
出版タイプ AM
出版タイプResource http://purl.org/coar/version/c_ab4af688f83e57aa
キーワード
言語 en
主題Scheme Other
主題 Fluorogenic substrate
キーワード
言語 en
主題Scheme Other
主題 In-gel assay
キーワード
言語 en
主題Scheme Other
主題 Native-PAGE
キーワード
言語 en
主題Scheme Other
主題 Protein phosphatase
キーワード
言語 en
主題Scheme Other
主題 SDS–PAGE
KEID
値 4979
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Ver.1 2023-05-15 11:50:28.625713
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